用高效液相色譜法檢測(cè)水中萘酚含量的原理是將一定量酸化后的樣品（pH=1-2），用 C18固相萃取柱萃取，甲醇洗脫，洗脫液中的萘酚經(jīng)液相色譜分離后，用熒光檢測(cè)器檢測(cè)。根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。此方法可以用于地表水、生活污水、工業(yè)廢水中的萘酚測(cè)定，當(dāng)取樣體積為50ml，洗脫液體積為10.0ml，進(jìn)樣體積為10.0ul時(shí)，在發(fā)射波長(zhǎng)425nm處，本方法測(cè)定1-萘酚和2-萘酚的方法檢出限均為0.3ug/L，測(cè)定下限均為1.2ug/L；在發(fā)射波長(zhǎng)360nm處，本方法測(cè)定2-萘酚的方法檢出限為0.06ug/L，測(cè)定下限為0.24ug/L。
1.乙腈（CH3CN）：液相色譜純。
2.甲醇（CH3OH）：液相色譜純。
3.鹽酸：ρ（HCl）=1.18g/ml。
4.抗壞血酸（C6H8O6）。
5.1-萘酚：w（C10H7OH）≥99.5%。
6.萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ≈1000mg/L。
分別稱取0.10g（準(zhǔn)確至0.0001g）1-萘酚和2-萘酚于100 ml燒杯中，加入100mg抗壞血酸（5.4），用少量甲醇（5.2）溶解，轉(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中，用甲醇稀釋至標(biāo)線，混勻。分裝于棕色樣品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3個(gè)月。
也可購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，按標(biāo)準(zhǔn)溶液證書要求保存。
8.萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ：ρ=100 mg/L；
量取適量萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液于10 ml容量瓶中，用甲醇定容，混勻。分裝于棕色樣品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3個(gè)月。
9.萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ：ρ=10.0 mg/L；
量取1.00 ml萘酚混合標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ（5.8）于10 ml容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，混勻。于棕色樣品瓶中，密封，4℃以下避光冷藏，可保存3個(gè)月。
10.鹽酸溶液1+1。
11.鹽酸溶液：c=0.01mol/L。
量取1.8ml鹽酸溶液，用水稀釋至1000ml。
12.固相萃取柱C18：填料為十八烷基鍵合硅膠，500mg/6ml。
13. 微孔濾膜：0.45um，有機(jī)相。
1. 高效液相色譜儀：配有多通道熒光檢測(cè)器。
2.色譜柱：250 mm（長(zhǎng)）×4.6 mm（內(nèi)徑）×5 μm（粒徑），填料為十八烷基鍵合硅膠（C18）或其他等效液相色譜柱。
3.棕色采樣瓶：250ml 或 500 ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋玻璃瓶或磨口瓶。
4.棕色樣品瓶：2 ml、10 ml 或 50 ml 帶聚四氟乙烯襯墊的螺旋蓋玻璃瓶。
5.氣密性玻璃注射器：5 ml 或 10 ml，與微孔濾膜（5.13）配合使用。
6.固相萃取裝置。
將C18固相萃取柱固定在固相萃取裝置上，依次用9ml甲醇和9ml鹽酸溶液活化固相萃取柱，始終保持柱頭浸潤(rùn)。將樣品平衡至室溫，搖勻，量取10.0 ml-50.0ml樣品（可根據(jù)樣品中目標(biāo)化合物含量，適當(dāng)增加或減少取樣量）于樣品瓶中，然后使樣品以3-4 ml/min流速通過萃取柱。在柱填料剛好暴露于空氣之前，用5ml水，分2次沖洗樣品瓶，洗滌液一并轉(zhuǎn)移至柱上，棄去流出液，加壓擠出或抽干萃取柱中的水分。用10.0ml甲醇洗脫，接收洗脫液，待初始洗脫液流出后，關(guān)閉活塞，浸泡固相萃取柱至少5min。打開活塞，收集全部洗脫液于10ml棕色樣品瓶中，搖勻，用微孔濾膜過濾，待測(cè)。
流動(dòng)相：乙腈/水（含0.2%甲醇）=47/53；流量：1.2ml/min；進(jìn)樣體積：10.0ul；
柱溫：35℃；檢測(cè)器：熒光檢測(cè)器；激發(fā)波長(zhǎng)：228 nm；
發(fā)射波長(zhǎng)：同時(shí)測(cè)定1-萘酚和2-萘酚時(shí)，選425nm、435nm 或450nm；只測(cè)定2-萘酚時(shí)，選360nm、350nm。將其中一個(gè)波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng)，另一個(gè)作為輔助定性波長(zhǎng)。
分別取適量萘酚標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ或標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ于10ml 棕色容量瓶中，以甲醇定容，配制能覆蓋水樣濃度范圍的至少包含5個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液配制及其參考濃度見溶液配制及其參考濃度表。
按照儀器參考條件，由低濃度到高濃度對(duì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液依次進(jìn)樣，分離、檢測(cè)目標(biāo)化合物，記錄保留時(shí)間和峰高。以各標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度（ug/L）為橫坐標(biāo)，以其對(duì)應(yīng)的峰高為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
準(zhǔn)備好的水樣可以按照標(biāo)準(zhǔn)曲線建立中相同的儀器條件，按照水樣的制備步驟進(jìn)行檢測(cè)。
根據(jù)保留時(shí)間定性，也可根據(jù)試樣中目標(biāo)化合物在不同發(fā)射波長(zhǎng)下的峰高比與標(biāo)準(zhǔn)水樣比較（其相對(duì)偏差應(yīng)≤5%）輔助定性。必要時(shí)，可用液相色譜-質(zhì)譜法確認(rèn)。
用外標(biāo)法定量。試樣中目標(biāo)化合物的響應(yīng)值不應(yīng)超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限。否則，應(yīng)將水樣適當(dāng)稀釋后再萃取或適當(dāng)減少取樣量，計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù)。
最后通過相應(yīng)的計(jì)算公式得出結(jié)果。
1.水樣中的萘胺類等堿性有機(jī)化合物，在酸性條件下（pH=1～2）固相萃取，以鹽離子的形式存在于水相中，不被 C18固相萃取柱吸附，不干擾萘酚的測(cè)定。
2.水樣中的多環(huán)芳烴類，在本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件下，其響應(yīng)值很低，一般情況下不會(huì)干擾萘酚的測(cè)定。
3.其他在熒光檢測(cè)器上有響應(yīng)的酸性和中性有機(jī)化合物可能會(huì)干擾萘酚的測(cè)定，可通過改變流動(dòng)相的比例改善分離度，也可選擇在相對(duì)無干擾的檢測(cè)波長(zhǎng)下測(cè)定避免干擾。
4.為避免固相萃取柱穿透，水樣中目標(biāo)化合物總含量一般不應(yīng)超過200μg。否則，應(yīng)將水樣適當(dāng)稀釋后再萃取或適當(dāng)減少取樣量。
5.對(duì)于基體復(fù)雜、有機(jī)物含量未知的水樣，為避免穿透，可以分別用兩根固相萃取柱萃取不同體積的同一個(gè)水樣。例如分別萃取10.0ml 和20.0ml，當(dāng)后者的測(cè)定結(jié)果低于前者的20%時(shí)，即說明后者的吸附容量已達(dá)到飽和，需適當(dāng)減少取樣量或?qū)⑺畼酉♂尯笤俟滔噍腿 ?/span>
6.對(duì)于清潔的水樣，也可用微孔濾膜過濾后，直接進(jìn)樣。
最新動(dòng)態(tài)
